Untersuchungen zu viralen Hepatitiserregern bei der Pute

Zur Erlangung eines Überblickes zum Vorkommen viraler Hepatitiserreger aus deutschen Putenbeständen als eines der Ziele dieser Arbeit wurde Probenmaterial aus den Jahren 2011 bis 2022 aus der Routinediagnostik des Institutes für Geflügelkrankheiten und von aktuellen Einsendungen mittels Virusanzucht und PCR untersucht. Der Nachweis des Turkey Hepatitis Virus als Vertreter der Spezies Megrivirus chigalli, von aviären Reoviren und von Aviadenoviren, gelang jeweils überwiegend in Zäkaltonsillen. Vom Turkey Hepatitis Virus, das in sechs der insgesamt 30 Einsendungen detektiert wurde, gelang auch die Generierung von Sequenzen von vier Proben im Bereich der Proteine VP1 und 2A2. Diese zeigten beim Vergleich mit GenBank-Sequenzen die größten Gemeinsamkeiten mit Vertretern der Spezies Megrivirus chigalli und ordneten sich im Speziellen mit jenen, die aus dem Wirtstier Pute stammten, in einem phylogenetischen Stammbaum an. Weiters konnte die Anzahl positiver Einsendungen durch die Ergebnisse dieser Arbeit gemeinsam mit den Befunden aus der Routinediagnostik für aviäre Reoviren auf acht und für Aviadenoviren auf neun beziffert werden. Diese drei detektierten viralen Erreger können, ebenso wie das Hepatitis E-Virus, welches in dem zur Verfügung stehenden Probenmaterial nicht detektiert werden konnte, sowohl subklinische Infektionen als auch unter anderem Leberschädigungen hervorrufen. Der Zusammenhang mit pathologischen oder klinischen Auffälligkeiten konnte aufgrund des Fehlens detaillierter Vorberichte nicht ermittelt werden. Im zweiten Teil der Arbeit wurde der Fokus auf die Hepatische Lipidose bei Puten und die Frage nach der Beteiligung eines viralen Agens bei der Ätiologie dieser Erkrankung gelegt. Unter Verwendung des Next-Generation-Sequencing konnte in den Lebern betroffener Puten ein neues Virus der Familie Picornaviridae im Genus Tremovirus identifiziert werden, das nahe mit dem Aviären Enzephalomyelitisvirus verwandt ist und vorläufig Mecurvirus genannt wurde. Dieses war ebenfalls in Leberproben weiterer Fälle von Hepatischer Lipidose nachweisbar, nicht aber in einer Auswahl von Leberproben ohne Verdacht auf diese vermutlich multifaktorielle Erkrankung. Folglich kann die Hypothese aufgestellt werden, dass das Mecurvirus an der Pathogenese der Hepatischen Lipidose beteiligt sein könnte. Der dritte Teil der Arbeit widmete sich der Charakterisierung aviärer Reoviren bei der Pute. Für die Klassifizierung wurden unter Verwendung der RT-PCR in Anlehnung an die Protokolle von Kant et al. (2003) mit den Primern P1/P4 und von Jindal et al. (2014) mit den Primern ARV-S3f/S3r und der Sanger-Sequenzierung die Genomsegmente σC und σB herangezogen und entsprechende phylogenetische Stammbäume erstellt. In einem zweiten Schritt wurde sodann das Genomsegment σC von bisher nicht amplifizierbaren Isolaten mittels Next-Generation-Sequencing untersucht, woraufhin neue Primer abgeleitet wurden. In dem dazugehörigen Stammbaum zeigte sich eine Gruppierung sämtlicher ARV-Isolate von Puten, die mit dem Primer P1 sequenziert wurden, in Cluster 1 nach Gal et al. (2023), während die mit einem der abgeleiteten Primer sequenzierten Isolate ein neues Cluster 6 formierten, welches ausschließlich Sequenzen aus Puten enthielt