Funktionelle Charakterisierung equiner Enteroide in Hinblick auf die cAMP-abhängige Chloridsekretion

Der Gastrointestinaltrakt des Pferdes ist ein komplexes Organsystem mit vielen Funktionen. Sein Epithel zeichnet sich dabei als wichtiges Organ für Transport und Barriere aus, das anfällig für unterschiedlichste Erkrankungen und Dysfunktionen ist. Um bei der Erforschung jener Erkrankungen und der physiologischen Funktionen des equinen Darmes zukünftig auf (lebende) Tiere verzichten zu können, werden Enteroide, die das Darmepithel in vitro simulieren, benötigt. Für diese Arbeit wurden Darmschleimhautproben von Jejunum und Colon gesunder Pferde extrahiert und mit dessen intestinalen Stammzellen equine Jejunum- und Colonenteroide (eqJE und eqCE) kultiviert. Um die Funktionen des Pferdedarmes in vitro darstellen zu können wurden die Enteroide mit dem zyklischen Adenosinmonophosphat (cAMP) - Agonisten Forskolin behandelt. Das Forskolin bewirkt eine Stimulation des Chloridkanals Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) und führt daher zu einer vermehrten Chloridsekretion in das Lumen der Enteroide. Anhand der Umfangszunahme der einzelnen Enteroide konnte auf ein vermehrtes Wachstum, das im Vergleich mit der Kontrollgruppe bei eqJE signifikant war, geschlossen werden. Auch eqCE ist in der Lage zu sezernieren, jedoch nicht im selben Ausmaß wie eqJE. Dabei sind die sehr guten Anzucht- und Wachstumsbedingungen der Organoide zu berücksichtigen, die eine Größenzunahme aufgrund der Sekretion verschleiern könnte. Der Versuch hat gezeigt, dass sich Enteroide zur Erforschung des Intestinaltraktes des Pferdes eignen und künftig vermehrt für die Forschung am physiologischen Darm sowie an Erkrankungen eingesetzt werden sollten.