Mehrfarben-Durchflusszytometrie mit kreuzreaktiven, pferdespezifischen Antikörpern zur erstmaligen Immunzell-Charakterisierung im Esel

Diese Arbeit befasst sich erstmalig mit der Immunzell-Charakterisierung im Esel. Dafür wurden Vollblutproben von Eseln (n=4) mit kreuzreaktiven und pferdespezifischen Antikörpern markiert und anschließend mit einem Durchflusszytometer gemessen. Als Kontrolle wurden Vollblutproben von Pferden (n=4) mitgeführt. Da Pferde und Esel aufgrund der hohen phylogenetischen Verwandtschaft auch eine hohe Homologie der Proteinsequenzen (96,5%-100%) aufwiesen, wurden pferdespezifische Antikörper auf eine mögliche Kreuzreaktivität auf den Immunmarkern beim Esel getestet. Außerdem wurden Antikörper mit anderen Zielspezies, dem Rind und dem Menschen, verwendet. Diese wurden durch frühere Publikationen bereits als kreuzreaktiv mit Pferde-Markern bestätigt oder aufgrund eines breiten Anwendungsspektrums getestet. Antikörper gegen CD4 (Klon CVS4), CD5 (Klon CVS5), CD8 (Klon CVS21), CD14 (Klon 105), CD21 (Klon B-ly4), CD80/86 (Klon CD152 Fc chimera), CD105 (Klon SN6), CD172a (Klon DH59B) und MHC-II (Klon CVS20) führten zu einer positiven Markierung von Immunzellen beim Esel, wodurch eine Kreuzreaktivität bestätigt wurde. Der getestete Antikörper gegen CD13 (Klon CVS19) markiert die Zielzellen bei den Pferdeproben, aber nicht bei den Proben der Esel. Somit liegt nahe, dass keine Kreuzreaktivität mit Immunzellen des Esels vorliegt. Aufgrund der Vorwärtsstreuung (Forward Scatter, FSC) und der Seitwärtsstreuung (Side Scatter, SSC) konnten die Immunzellen im Vollblut einem Leukozytensubset zugeordnet werden. Die durchschnittliche Frequenz der Zellpopulationen beider Spezies unterschied sich bei CD4, CD14, CD105 und CD172a um 10-20%. Die Differenz bei den übrigen Populationen, die durch andere Marker definiert wurden, lag unter 10%. Die Resultate dieser Arbeit zeigen, dass man wegen der sehr ähnlichen Verteilung der Immunzellen vorangegangene immunologische Forschungen des Pferdes als Grundlage für weitere Forschungen am Esel verwenden kann. Aufgrund der Tatsache, dass Esel bislang kaum erforscht sind, sind weitere wissenschaftliche Arbeiten, vor allem im Bereich der Immunologie, von großer Notwendigkeit.