Сравнительный анализ методов экстракции РНК из образцов периферической крови

Введение. Периферическая кровь активно используется в качестве биологического образца для изучения уровня экспрессии РНК различных генов. Экстракция РНК является ключевым этапом молекулярно-генетического анализа. Для ее проведения в лабораториях применяются различные методы. Цель. Проведение сравнительного анализа различных методов выделения РНК из образцов периферической крови, а также проведение оценки качества экстрагированной РНК. Материалы и методы. В качестве образцов были использованы 50 проб периферической крови здоровых доноров. Для сравнительного анализа были использованы четыре коммерческих набора реагентов для выделения нуклеиновых кислот. Концентрацию и чистоту выделенной РНК измеряли на спектрофотометре (Blue-Ray Biotech, США) и флуориметре Qubit 4.0 (Thermo Scientific, США). Оценку эффективности выделения РНК проводили методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени. Разработанные праймеры и флуоресцентно-меченые зонды, а также оригинальные реагенты были производства ФГБУ «ЦСП» ФМБА России. Статистический анализ проводился с использованием программы StatTech v. 4.5.0 (разработчик – ООО «Статтех», Россия). Различия считались значимыми при p