Spheroid Generation in Microcavities

Dieses Videotutorial zeigt einen praxisnahen Workflow zur standardisierten Generierung von 3D‑Sphäroiden in Mikrokavitäten unter Verwendung von CaviSphere® MicroSphere‑PC‑Folien in CellCrown™‑Inserts. Das Protokoll basiert auf der langjährigen Erfahrung der Arbeitsgruppe „3D Zellkultursysteme“ am Institut für Funktionelle Grenzflächen des Karlsruher Instituts für Technologie (KIT), die CaviSphere®‑Mikrokavitäten in verschiedenen 3D‑Zellkultur- und Organoidmodellen einsetzt und dafür standardisierte Protokolle entwickelt hat. Schritt für Schritt werden Vorbereitung und Desinfektion der zweiteiligen Inserts und (Sensor-)Arrays mit Natriumazid, Wasser und 80 % Isopropanol demonstriert, einschließlich der Entfernung von Luftblasen aus den Mikrokavitäten. Anschließend wird die korrekte Orientierung und Montage der CaviSphere®‑Folien im CellCrown™ gezeigt, gefolgt von der Beschichtung der Mikrokavitäten (z. B. mit BIOFLOAT™, alternativ Pluronic oder Kollagen). Das Video erläutert das Befüllen mit Medium, wiederholte Zentrifugation zur Blasenentfernung, das Aufbringen der Zellsuspension und die Sedimentation der Zellen in die Mikrokavitäten. Bereits nach 24 Stunden lässt sich die Sphäroidbildung beobachten. Das Tutorial unterstützt Forschende dabei, reproduzierbare 3D‑Sphäroide im 12‑Well‑Format zu erzeugen und CaviSphere®‑Folien sicher in bestehende Zellkultur- und Assay‑Workflows zu integrieren.