Establishment of a Cas9-Expressing Immortalized Porcine Alveolar Macrophage Model for PRRSV Research and CRISPR-Based Gene Editing
Abstract
본 연구는 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 연구에 활용 가능한 CRISPR 기반 in vitro 유전자 편집 플랫폼을 구축하기 위하여, Cas9을 안정적으로 발현하는 불멸화 돼지 폐포대식세포주(Cas9-iPAM)를 확립하고 그 유용성을 체계적으로 검증하였다. Cas9 유전자는 ROSA26 좌위에 부위 특이적으로 삽입되었으며, 확립된 Cas9-iPAM은 모세포인 iPAM의 형태학적 특성을 유지하는 동시에 PRRSV 감염에 필수적인 수용체인 CD163의 안정적인 발현을 보였다. 기능적 분석 결과, Cas9-iPAM에서는 gRNA 단독 도입만으로도 CD163 유전자에 대한 효율적인 편집이 가능함을 확인하였다. 또한 AAV 혈청형별 전달 효율을 비교한 결과, iPAM에서는 AAV4 처리 시 eGFP mRNA 발현이 대조군 대비 약 900배 증가한 반면, Cas9-iPAM에서는 AAV1과 AAV5에서 상대적으로 높은 전달 효율이 관찰되었다. 이러한 결과는 Cas9 발현 여부가 gRNA 전달 전략 수립에 있어 핵심적인 결정 요인임을 시사한다. 종합적으로 본 연구는 Cas9-iPAM이 PRRSV 감염 기전 규명과 유전자 기능 분석뿐 아니라, gRNA 전달 전략 최적화를 포함하는 CRISPR 기반 in vitro 유전자 편집 플랫폼으로 활용될 수 있음을 제시한다.
Fields of Study & Subjects
CRISPR and Genetic Engineering
Animal Genetics and Reproduction
Animal Virus Infections Studies
Publication details
- Journal / source
- Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
- Volume
- 27
- Issue
- 1
- Pages
- 1175–1185
- Publication date
- 31 January 2026
- Language
- EN