Obtención de medios condicionados de células madre mesenquimatosas del estroma de la gelatina de Wharton en un sistema de cultivo dinámico

Introducción. Las células madre mesenquimatosas del estroma tienen un gran potencial terapéutico por los efectos antiinflamatorios, antiapoptóticos y proangiogénicos que se pueden obtener a partir de su secretoma. La gelatina de Wharton constituye una de las mejores fuentes de células madre mesenquimatosas. El secretoma de estas células contiene moléculas bioactivas capaces de mantener la homeostasis celular y tisular para el tratamiento de enfermedades asociadas con procesos inflamatorios, heridas cutáneas, trastornos neurodegenerativos y diabetes.Objetivo. Describir un protocolo para obtener medios condicionados de células madre mesenquimatosas del estroma aisladas de la gelatina de Wharton, mediante cultivos celulares dinámicos, considerando que los sistemas tridimensionales ofrecen ventajas sobre los bidimensionales, al replicar mejor las condiciones del microambiente celular in vivo.Materiales y métodos. Se utilizaron células madre mesenquimatosas del estroma de la gelatina de Wharton. Se caracterizaron mediante la evaluación de su inmunofenotipo por citometría de flujo y por la multipotencialidad por inducción de la diferenciación a linajes mesenquimatosos in vitro. Las células se cultivaron en cultivos bidimensionales (monocapa) y tridimensionales en un biorreactor Applikon Biotechnology de 3L, utilizando microperlas plásticas como microtransportadores. Se estandarizó la obtención de medios condicionados y se detectaron 43 factores angiogénicos, utilizando un sistema de micromatriz de anticuerpos para angiogénesis humana.Resultados. Las células aisladas presentaron características típicas de las células madre mesenquimatosas del estroma. El cultivo tridimensional facilitó la escalabilidad y mejoró la secreción de factores angiogénicos, en comparación con el bidimensional.Conclusiones. Se utilizaron cultivos tridimensionales y bidimensionales para obtener el secretoma. Los primeros permiten obtener volúmenes significativamente mayores de medio condicionado con aumento de la potencial capacidad angiogénica.