Strategien zur Verstärkung der antikörpervermittelten Effektorzellaktivierung beim Multiplen Myelom

Die antikörperabhängige zellvermittelte Zytotoxizität (ADCC) und die antikörperabhängige zelluläre Phagozytose (ADCP) leisten nachweislich einen wichtigen Beitrag zur Effektivität des CD38-Antikörpers Daratumumab. Im Rahmen dieser Arbeit wurden Strategien zur Verstärkung dieser Wirkmechanismen entwickelt, um die CD38-gerichtete Myelomtherapie zu verbessern. Durch Modifikation der Fc-Domäne (Fc-Engineering) sollte eine optimierte Fc-Rezeptorbindung und somit eine erhöhte ADCC-Aktivität von Daratumumab erreicht werden. Hierfür wurde eine Protein-optimierte Variante Dara-DE mit der zweifachen Aminosäuresubstitution S239D/I332E generiert. Zur Steigerung der ADCP-Aktivität wurde der Antikörper mit einem immunmodulatorischen Fusionsprotein SIRPα-Fcσ kombiniert, welches die Phagozytose-hemmende Interaktion zwischen dem signal regulatory protein (SIRP) α auf Makrophagen und seinem Liganden CD47 blockiert. Dara-DE und SIRPα-Fcσ wurden mit rekombinanter DNA-Technik generiert, in eukaryoten Zellen exprimiert, gereinigt, charakterisiert und hinsichtlich ihrer in vitro Zytotoxizität analysiert. Dara-DE erwies im Vergleich zu Daratumumab eine signifikant gesteigerte ADCC-Aktivität gegenüber Tumorzelllinien. Einzelne autologe Experimente gaben ebenfalls Hinweise auf eine gesteigerte ADCC. Das Potential zur ADCP-Induktion entsprach dem von Daratumumab. SIRPα-Fcσ zeigte in Kombination mit Daratumumab eine signifikant gesteigerte ADCP maligner Myelomzellen durch Makrophagen im Live Cell Imaging und eine gering gesteigerte ADCP in der Durchflusszytometrie. Autologe Phagozytose-Experimente gaben Hinweise auf eine gesteigerte Daratumumab-vermittelte Phagozytose durch SIRPα-Fcσ. SIRPα-Fcσ allein zeigte keine zytotoxische Wirkung.