棕矢车菊素调节EGFR/MAPK信号通路对膀胱癌细胞增殖、凋亡和血管生成的影响

目的探究棕矢车菊素（Jace）调节表皮生长因子受体（EGFR）/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对膀胱癌（BC）细胞增殖、凋亡和血管生成的影响。方法体外实验：采用六组不同浓度Jace（0 μmol/L对照组，10、20、40、80、160 μmol/L实验组）进行体外细胞实验，通过CCK-8法评估人BC细胞J82细胞系的存活率变化，通过半数抑制浓度（IC50）筛选浓度。将J82细胞随机分为空白对照组（NC组）、低剂量Jace组（Jace-L组）、中剂量Jace组（Jace-M组）、高剂量Jace组（Jace-H组）、联合干预组（Jace-H+pc-DNA-NC组、Jace-H+EGFR组）。BrdU实验测定各组细胞增殖能力；AO/EB和流式细胞术测定各组细胞凋亡变化；血管生成实验测定各组细胞血管生成情况；免疫荧光染色和Western blot检测各组细胞增殖、凋亡、血管生成及EGFR/MAPK通路相关蛋白表达。体内实验：采用J82细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型，建模成功的小鼠随机分成NC组和Jace组。检测各组裸鼠移植瘤生长状况；Western blot测定移植瘤组织中EGFR/MAPK通路相关蛋白表达变化。结果根据IC50值分析采用20 μmol/L、40 μmol/L和80 μmol/L三个梯度浓度的Jace作为后续实验组的干预浓度。与NC组比较，Jace-L组、Jace-M组、Jace-H组细胞BrdU阳性率、血管形成数量、Ki67平均荧光强度、Bcl-2平均荧光强度、VEGF平均荧光强度、p-EGFR/EGFR、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK表达减少，凋亡率、Bax平均荧光强度增加（P